天花检查
凡未接种过牛痘而又接触了天花病人且在10~14日内发病者,全部可考虑本病,如果再出现典型皮疹,即可诊断。根据其皮疹的形态,分布及发展过程等特点,结合流行学病情况,典型病例诊断不难。疑难病例的确诊,有赖于病毒与血清免疫学的检查。
1、血象
前驱期白细胞总数略低,淋巴细胞相对增多。脓疱期白细胞总数及中性粒细胞增多。
2、血清学检查
可用补体结合试验、红细胞凝集抑制试验、中和试验检测患者血清是否存在有特异性抗体,以帮助诊断。
(1)取疱疹、脓疱液或痂皮研碎后的悬液,用高价免疫血清检测天花病毒抗原。
(2)取患者的鼻咽分泌物、血液、疱疹液或痂皮悬液进行病毒分离。血清学试验(血凝抑制试验、补体结合及中和试验)亦有助于诊断。
天花患者早在病程第4天,血清中即可出现天花病毒抗体;于病后第7天,绝大部分患者补体结合试验呈阳性反应。第10~11天效价可达1∶640。而有种痘史的非天花患者,效价很少超过1∶40;但是,倘若有种痘史的可疑患者在病程后期血清抗体效价比早期增长4倍,则具诊断价值。
病理变化:表皮有网状变性、气球状变性或凝固性坏死。因网状变性比较明显,故大多产生多房性水疱。早期受累的细胞质内可找到Guamieri小体,为圆形或卵圆形,呈嗜伊红性及Feulgen阳性,周围常绕以不着色的透明区。此外,在陈旧皮损内常见到核内嗜伊红包涵体,真皮内除有轻度炎症反应外,有时见出血。
3、病原体检查
(1)直接涂片检查
天花病毒包涵体:取疱疹液、或疱疹溃疡底部拭子涂于玻片上,干燥后用苏木精-伊红(H-E)染色,在光学显微镜下观察上皮细胞的胞质。若系天花患者,可在其中查见天花病毒嗜酸性包涵体。但是,涂片阴性不能排除天花。
(2)电镜检查:
自病变部取材,用电镜观察,天花病毒呈砖形,数小时内可确诊。
(3)鸡胚接种或细胞培养:
取疱疹液、痂皮悬液、血或鼻咽部分泌物,接种于鸡胚绒毛尿囊膜分离病毒;或接种猴肾细胞或羊膜细胞作培养,12h后即可见到多数微小包涵体,48h后包涵体显著增大,有时可见核内包涵体。