多药耐药（MDR）基因检测

基本信息

多药耐药(MDR)基因编码P-糖蛋白(P-170)，该蛋白位于细胞膜上，有药物泵作用，将进入细胞的药物泵出细胞外而使细胞产生耐药。MDR阳性表示各种癌症的多药耐药。

随着分子生物学的发展，检测手段不断增加。目前主要从分子水平、蛋白水平、细胞水平多途径展开了研究。

1.分子水平：由于人肿瘤细胞几乎不存在MDR1DNA扩增，因此，无法检测DNA变化，主要是检测MDR1mRNA的表达水平。常用的方法包括：RT-PCR、原位杂交(ISH)、Slot-blot(SB)、Northernblot(NB)、RNase保护实验等。

2.蛋白水平：免疫组织化学法(IHC)，免疫荧光等。常用的P-gp特异性单克隆抗体有JSB-1、MRK1、C219、U12、HYB-612等，不同的单抗识别不同的抗原决定簇，每种单抗特异性和亲合力不完全相同。

3.细胞水平：检测细胞的药物输出功能，采用荧光染料如若丹明-123或具有天然荧光的柔红霉素与细胞共同培养后，用荧光分光度计测定单个细胞内药物浓度，与对照组比较判定细胞的耐药程度。