北京协和医院
三级甲等综合医院国营
北京协和医院是集医疗、教学、科研于一体的现代化综合三级甲等医院,是国家卫生健康委指定的全国疑难重症诊治指导中心,最早承
丁型肝炎抗体的测定原理:采用双抗体夹心ELISA法。先用去污剂(Tween20或NP40)裂解在外面的HBsAg膜,则释放出的HDVAg与包被在板上的抗-HDVIgG结合,洗涤后加入酶标抗-HDV,显色为阳性,无色为阴性。RIA法原理基本同上述。
试剂:国内有商品化试剂盒供应,内含HDV包被反应板(条),抗HDV-HRP应用液以及抗HDV阴、阳性对照血清,底物液,终止液等试剂。
操作方法:按试剂盒使用说明书进行操作。
(1)加样品:在包被反应板各孔内加入样品50μl,每次检验设阴、阳性对照,37℃保温1h,洗板3次。
(2)加酶结合物:每孔加入抗HDV-HRP50μl,37℃保温1h,洗板5次。
(3)显色:各孔加入底物液100μl,室温保温15min后,各孔加入终止液50μl。
(4)结果判读:在酶标仪上以试剂空白校零点,测各孔在492nm光密度值,先计算判断值,然后判断结果:
当样品A值高于判断值为阴性,低于判断值为阳性。
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