北京协和医院
三级甲等综合医院国营
北京协和医院是集医疗、教学、科研于一体的现代化综合三级甲等医院,是国家卫生健康委指定的全国疑难重症诊治指导中心,最早承
EB病毒抗体的测定原理:E-BV感染细胞(抗原)+待检血清+荧光素标记抗人IgA抗体→细胞内荧光“+”阳性“-”阴性。
试剂:
(1)抗补体C3免疫血清,用菊糖吸附正常人新鲜血清的C3免疫兔所制成。
(2)兔抗人补体C3酶标抗体,采用过碘酸钠法将HRP标记兔抗人补体C3免疫球蛋白。
(3)BSS稀释液,8g/LNaCl,0.14g/LCaCl2,0.4g/LKCl,0.2g/LMgSO4·7H2O,0.6g/LKH2PO4,0.6g/LNa2HPO4·2H2O,pH6.9。
(4)补体,正常人新鲜血清。
(5)标本制备,例如NPC病人的鼻咽部肿瘤脱落细胞涂在载玻片上,室温干燥,用冷丙酮在4℃固定10min。
操作方法:
(1)在细胞涂片上加入最终浓度为1∶10的NPC病人血清和1∶10正常人血清,置37℃湿盒内1h。
(2)用BSS液浸洗3次,每次5min。
(3)加1∶10稀释的HRP标记的抗C3抗体,置37℃温盒内30min。
(4)再BSS液洗3次。
(5)浸入酶底物(50mg3,3'-二氨基联苯胺溶于100ml0.05mol/LpH7.6Tris-HCl缓冲液加30%H2O20.1ml)染色。
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